Uso de la electroforesis unicelular en gel para detección de inestabilidad genómica en sujetos fumadores

Uso de la electroforesis unicelular en gel para detección de inestabilidad genómica en sujetos fumadores

Alejandra Locken-Castilla¹, Ángel Ceballos-Cruz¹ y Elda L. Pacheco-Pantoja¹

¹Universidad Anáhuac Mayab. km 15.5 Carr. Mérida-Progreso CP. 97310. Mérida, Yucatán, México.

Autor de correspondencia:  elda.pacheco@anahuac.mx

RESUMEN

La electroforesis unicelular en gel o ensayo cometa (EC), es una técnica versátil, confiable y de bajo costo, para la estimación cualitativa y cuantitativa de la fragmentación del ADN nuclear. En el presente estudio se utilizó para el análisis fenotípico de daño genómico, en sujetos fumadores y no fumadores. Se realizó un estudio observacional, transversal, en adultos residentes de Yucatán, ambos sexos. A los participantes se les aplicó una encuesta sobre tabaquismo, antecedentes heredofamiliares de cáncer (AHC) y estilo de vida. Para el EC, se aislaron las células mononucleares de sangre periférica (CMSP) mediante un gradiente de densidad. Las CMSP se trataron con H₂O₂ o con PBS y se incluyeron en minigeles, los cuales se sometieron a lisis y electroforesis, tiñeron con EtBr  y  examinados con microscopía de fluorescencia. La aproximación se realizó con un software libre (OpenComet).  Para el análisis de datos se establecieron 6 grupos: adulto joven, adulto maduro y adulto mayor; subdivididos en fumadores y no fumadores. Se observó una diferencia significativa (p<0.05) en el grupo de edad intermedio (Adultos maduros) de fumadores con respecto a sus pares no fumadores, con mayores indicadores de inestabilidad genómica (IG) en el cuerpo de cometa y cabeza. Un modelo de regresión logística integrado con los diversos factores reveló que la única variable predictora que permaneció significativa fue la presencia de AHC (p=0.039). Aunque es ampliamente reconocido el daño del tabaco al organismo, estos resultados confirmaron que la IG puede ser modulada por otros factores (antecedentes heredofamiliares, estilo de vida, entre otros).

Palabras clave: Ensayo cometa, inestabilidad genómica, tabaquismo

Para citar:

Locken-Castilla, A., Ceballos-Cruz, Á. y  Pacheco-Pantoja¹, E.L. (2018) Uso de la electroforesis unicelular en gel para detección de inestabilidad genómica en sujetos fumadores. Revista del Centro de Graduados e Investigación. Instituto Tecnológico de Mérida, 33(73),286-289