Albornoz-Abud2,
Nacira A.; Collí-Dulá1,2, Reyna C.; Zapata-Pérez2, José
O. y Marín-Canul3, Gerson F.
1CONACYT,
2Departamento de Recursos del Mar, Cinvestav del IPN, Unidad Mérida,
Yucatán, México, 3ITESCAM, Calkiní, Campeche, México.
Autor de correspondencia: rcolli.dula@cinvestav.mx
RESUMEN
El
Benzo[a]pireno (BaP) es un hidrocarburo policíclico aromático (HAP) ubicuo, descrito como carcinogénico,
genotóxico, mutagénico y disruptor endocrino. Los HAP han sido catalogados como modificadores
epigenéticos debido a que causan cambios en la metilación global del ADN que
pueden llevar a la inestabilidad genómica y posteriores efectos en el fenotipo.
Estudios diversos
han detectado efectos en enzimas involucradas en la metilación del ADN cómo las
enzimas DNMT y TET (DNA Methytransferases y Ten Eleven Translocation enzymes,
respectivamente). Así como
la cuantificación de cambios en la expresión génica la cual puede ser utilizada para detección
temprana y predicción de posibles eventos en expresión fenotípica. Por
lo cual, el objetivo
del presente estudio fue validar reacciones de qPCR (quantitative Polymerase
Chain Reaction) del gen DNMT1 y TET3 en una especie no modelo O. niloticus de importancia ecológica y
económica, para evaluar el
efecto del BaP en dichos genes. En este estudio, tilapias adultas fueron
expuestas a una dosis
aguda de BaP (40mg.kg-1), se tomaron muestras de hígado y gónada a
24, 48, 72 y 120 h para posteriormente extraer el ARN, realizar el análisis de
qPCR y validar las curvas estándar para los genes objetivo mediante el método 2-∆∆CT. En los resultados, se obtuvieron buenas eficiencias en
las reacciones de qPCR y una adecuada validación de
las curvas estándar. Por lo tanto, los
niveles de expresión de los genes TET3
y DNMT1 para tilapia, pueden ser medidos confiablemente
utilizando las
condiciones optimizadas y descritas
de los
cebadores validados en este
trabajo.
Palabras
claves: Benzo [a] pireno, RT-PCR tiempo real, epigenéticos.
Para citar:
Albornoz-Abud, N.A., Collí-Dulá, R.C., Zapata-Pérez,
J.O. y Marín-Canul, G.F. (2018) Validación de la técnica RT-PCR tiempo real para genes involucrados en mecanismos epigeneticos en O. niloticus. Revista
del Centro de Graduados e Investigación. Instituto Tecnológico de Mérida, 33(73),119-122
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